Es muy interesante conocer los trabajos de investigación de los integrantes del Programa de Biominds. Compartir con otros estudiantes de los distintos recintos de la Universidad de Puerto Rico, que tenemos los mismos intereses, ha sido una muy buena experiencia.
Técnicas de laboratorio de investigación
Las técnicas que he utilizado en el laboratorio de investigación han sido el cultivo de bacteria, replicado o “screening” de placas, estriado en placas Petri y tinción Gram.
En el laboratorio he cultivado los clones de E.coli en medio B4+ cloranfenicol sólido y líquido, y el medio de Simmons citrato agar. Se han estriado de forma continua, por el método de cuadrantes. En una placa Petri, se han dividido en 8 y 50 cuadrantes para la replicación o screening de las biblioteca del Observatorio Microbiano de Las Salinas en Cabo Rojo, con las cuales estamos trabajando. La tinción Gram la he utilizado para observar en el microscopio, los cristales producidos por los clones de E.coli de la biblioteca que estamos utilizando; en el experimento de precipitación de carbonatos en medio B4+cloranfenicol.
Trabajo en equipo
Mi experiencia de trabajo en equipo ha sido muy agradable. El trabajo en equipo me ha ayudado a compartir ideas, a resolver los problemas y en la realización del procedimiento de la investigación. La colaboración es muy importante ya que agiliza el proceso de la investigación, buscando alternativas o estrategias para llevar a cabo el experimento. Se divide las tareas para que cada integrante trabaje, lograr tener la mayor cantidad de datos y así realizar una excelente investigación. Las características que son importantes para mantener un buen equipo de trabajo son la responsabilidad, la comunicación, el compromiso y dedicación.
Descripción del proyecto de investigación
La Dra. Lilliam Casillas es la mentora de la investigación para el cual estaré realizando como parte del programa Biominds. El propósito de la investigación es identificar clones de la Biblioteca genómica del Observatorio Microbiano Las Salinas en Cabo Rojo, que degraden citrato (ácido cítrico). Estos clones de la bacteria Escherichia coli tienen plasmidios que contienen un pedazo de ADN de 30 kilobases de los mats del Observatorio Microbiano de Las Salinas en Cabo Rojo.El procedimiento se realizará utilizando la prueba de utilización de citrato, como única fuente de carbono. Se utilizará el medio de Simmons citrato agar, el cual contiene el indicador de pH azul de bromotimol. Este medio contiene citrato de sodio como única fuente de carbono y fosfato de amonia, como única fuente de nitrógeno. El indicador azul de bromotimol que se encuentra en el medio detecta el aumento del pH producido en la hidrólisis de citrato, cambiando el color del medio de verde a azul. El pH del medio puede aumentar sobre 7.6. La hidrólisis de citrato es mediado por la enzima citrasa, la cual la bacteria E. coli no tiene por lo que no degrada en su metabolismo.La metodología consiste en transferir la bacteria E. coli a un tubo inclinado con el medio de Simmons citrato agar. Se incubará el cultivo a 37°C por un periodo de 24-48 horas. Luego se examinará el tubo para observar si hay cambio en el color del medio, indicando la hidrólisis de citrato.
