Descripción del proyecto de investigación

             La Dra. Lilliam Casillas es la mentora de la investigación para el cual estaré realizando como parte del programa Biominds.  El propósito de la investigación es identificar clones de la Biblioteca genómica del Observatorio Microbiano Las Salinas en Cabo Rojo, que degraden citrato (ácido cítrico).  Estos clones de la bacteria Escherichia coli tienen plasmidios que contienen un pedazo de ADN de 30 kilobases de los mats del Observatorio Microbiano de Las Salinas en Cabo Rojo.El procedimiento se realizará utilizando la prueba de utilización de citrato, como única fuente de carbono.  Se utilizará el medio de Simmons citrato agar, el cual contiene el indicador de pH azul de bromotimol.  Este medio contiene citrato de sodio como única fuente de carbono y fosfato de amonia, como única fuente de nitrógeno.  El indicador azul de bromotimol que se encuentra en el medio detecta el aumento del pH producido en la hidrólisis de citrato, cambiando el color del medio de verde a azul.  El pH del medio puede aumentar sobre 7.6.  La hidrólisis de citrato es mediado por la enzima citrasa, la cual la bacteria E. coli no tiene por lo que no degrada en su metabolismo.La metodología consiste en transferir la bacteria E. coli a un tubo inclinado con el medio de Simmons citrato agar.  Se incubará el cultivo a 37°C por un periodo de    24-48 horas.  Luego se examinará el tubo para observar si hay cambio en el color del medio, indicando la hidrólisis de citrato.